
|
Влияние заливочной среды на ткань
Влияние заливочной среды на ткань: Ни одна из заливочных сред не является химически инертной, в связи с чем необходимо учитывать их возможное влияние на ткань. О воздействии па ткань различных фиксаторов написано очень много, тогда как о влиянии на ткань разных заливочных сред известно мало.
Эта ситуация отражает недостаток твердо установленных фактов о таких влияниях и явно свидетельствует о необходимости проведения значительно большего числа исследований в этой области. Метакрилаты обладают способностью быстро испаряться под действием электронного луча; при этом из ткани улетучиваются некоторые вещества, и особенно белки. Использование эпоксидных и полиэфирных смол позволило частично устранить этот недостаток. Было показано, что мономеры эпона, аралдита и метакрилатов растворяют жиры. При обезвоживании ткани, фиксированной альдегидом, в водорастворимых заливочных средах возрастающей концентрации (как это часто и делается) происходит экстракция гликогена, а липидные компоненты ткани теряются, если процедуру обезвоживания не проводить при температуре, равной примерно -20°С. Важность строгого соблюдения принятой методики обработки ткани. Мы рассмотрели методы обработки ткани, применяемые в электронной микроскопии. Из всего сказанного ясно, что мнения различных авторов относительно времени и температуры фиксации, величины и осмотического давления фиксатора, наилучших способов обезвоживания и заливки ткани в значительной степени расходятся. Ясно также, что с момента выбора экспериментального животного и до просмотра ультратонких срезов в микроскопе перед исследователем встает пугающее множество различных вариантов фиксации, обезвоживания и заливки. В идеальном случае ткань, выбранную для исследования, следовало бы вначале изучить в серии строго контролируемых экспериментов, с тем чтобы точно установить, как тот или иной вариант влияет на ее ультраструктуру. На практике это делается редко; исключение составляют лаборатории, специально занимающиеся именно этими проблемами. |
Электронная микроскопия Обработка тканей Обезвоживание и заливка Усиление контраста |