
|
Типы заливочных сред
Для того чтобы электронный луч прошел сквозь срез ткани, толщина этого среза не должна превышать 1000 А (0,1 мкм). Используя обычные гистологические среды, например парафин, получить такие тонкие срезы невозможно. Именно поэтому в самые первые годы развития электронной микроскопии особое внимание было уделено поискам подходящего для заливки материала.
Метакрилаты. Первым заливочным материалом, нашедшим широкое применение в практике электронной микроскопии, был бутилметакрилат. Это вещество представляет собой акриловый пластик, близкий по своему химическому составу к перспексу. Позднее обнаружили, что при смешивании бутил и метилметакрилатов в различных соотношениях можно получить заливочные .среды соответствующей степени твердости или мягкости, которые позволяют резать различные ткани на срезы толщиной 500 А и менеебольшая часть ранних поисковых исследований в электронной микроскопии была выполнена на тканях, залитых в метакрилаты. Сморщивание ткани при полимеризации метакрилатов часто достигает 20%, а сам процесс полимеризации может проходить неравномерно, что сопровождается повреждением ткани. Если не принять специальных мер предосторожности, то вокруг ткани могут собраться пузырьки воздуха. Срезы заключенной в метакрилат ткани могут перемещаться под воздействием электронного луча (так называемое термальное смещение). Электронный луч способствует также испарению (возгонке) метакрилата; это увеличивает контрастность объекта, но вызывает также и загрязнение микроскопа. Кроме того, метакрилатные срезы довольно хрупки и не выдерживают давления электронного луча, если металлическая сетка, на которой монтируются срезы, не покрыта тонкой пленкой коллодия или формвара. Это, конечно, увеличивает толщину материала, через который проходит электронный луч, и снижает разрешающую способность. Эпоксидные смолы. В середине 50-х годов Глауэрт и др. предложили в качестве заливочной среды для электронной микроскопии использовать аралдит, а Кушида и Финк -Эпсон. Применение этих эпоксидных смол позволило решить ряд проблем, которые возникали при заливке в метакрилаты. В значительной степени уменьшилось сморщивание и повреждение ткани при полимеризации, перестало быть проблемой образование воздушных пузырьков внутри блока. |
Электронная микроскопия Обработка тканей Обезвоживание и заливка Усиление контраста Кухни подбираются исходя из вкуса клиента, кухни из дерева на заказ по индивидуальным проектам.
|