Обезвоживание и заливка: Для того чтобы приготовить из фиксированной ткани достаточно топкие для электронной микроскопии срезы, необходимо пропитать эту ткань материалом для заливки, который будет ее поддерживать и сведет к минимуму повреждения при резке.

Среды для заливки, наиболее часто применяемые в электронной микроскопии, не смешиваются с водой. Следовательно, для того чтобы ткани полностью пропитались заливочной средой, вода в ткани должна быть замещена каким-либо веществом, способным смешиваться с заливочной средой.

Для этой цели использовали различные обезвоживающие вещества, в том числе ацетон и метанол, однако сейчас пришли к единому мнению, что этиловый спирт (этанол) удаляет воду из ткани, наименее повреждая ее. Однако, поскольку спирт растворяет липиды, обезвоживание нужно проводить очень быстро, чтобы избежать вымывания луч неодержащих компонентов клетки.

Если из фиксатора ткань сразу же перенести в 100%-ный этанол, то могут возникать механические повреждения вследствие изменения поверхностного натяжения и токов, образующихся при смешивании этих жидкостей. Для уменьшения повреждений ткань "проводится" по ряду спиртов возрастающей концентрации, скажем 70, 90 и 100%. Это легко сделать, отсасывая пипеткой или сливая одну жидкость и заменяя ее другой.

Обычно оказывается достаточным десятиминутное пребывание ткани в каждом из спиртов указанной выше концентрации с последующей пятнадцатиминутной обработкой в двух сменах 100%-ного ("абсолютного") этанола. Обезвоживание проходит лучше, если во время этой процедуры сосуды с тканью и спиртами поместить па медленно вращающийся диск. Если среда, используемая для заливки, смешивается с этанолом, то сразу же после обезвоживания ткань можно перенести в эту заливочную среду.

В противном случае ткань нужно обработать какой-либо жидкостью, которая смешивается как с этанолом, так и с заливочной средой. Когда для заливки применяют эпоксидные смолы, то в качестве такой промежуточной среды используют эпоксипронап (проннленоксид), в двух сменах которого ткань достаточно обработать в течение 5 мин. Затем ткань переносят в небольшой пластиковый сосуд, содержащий неполимеризованную заливочную среду.